-
1 expression of polymerase chain reaction
Экспрессия ПЦР — техника, объединяющая ПЦР, или полимеразную цепную реакцию, с транскрипцией и трансляцией in vitro определенного фрагмента ДНК (гена) с тем, чтобы получить амплифицированный продукт (белок) (см. Амплификация). Для этого интересующий ген сначала амплифицируют с помощью ген-специфичного смыслового и антисмыслового праймеров. 5'-конец смыслового праймера содержит область из 12 перекрывающихся п. о. После процедуры амплификации этот участок удлиняется с помощью Taq-полимеразы путем присоединения экспрессионной кассеты, содержащей сайт инициации транскрипции для Т 7 РНК-полимеразы, 5'-нетранслируемую лидерную последовательность из вирусного гена и стартовый кодон ATG. Лидерная последовательность, в свою очередь, несет сайт для связывания с рибосомами. Затем такая рекомбинантная молекула амплифицируется с помощью универсального и антисмыслового праймеров. Образующийся ПЦР-продукт in vitro транскрибируется в иРНК, а затем транслируется в белок.Англо-русский толковый словарь генетических терминов > expression of polymerase chain reaction
-
2 PCR-expression
Экспрессия ПЦР — техника, объединяющая ПЦР, или полимеразную цепную реакцию, с транскрипцией и трансляцией in vitro определенного фрагмента ДНК (гена) с тем, чтобы получить амплифицированный продукт (белок) (см. Амплификация). Для этого интересующий ген сначала амплифицируют с помощью ген-специфичного смыслового и антисмыслового праймеров. 5'-конец смыслового праймера содержит область из 12 перекрывающихся п. о. После процедуры амплификации этот участок удлиняется с помощью Taq-полимеразы путем присоединения экспрессионной кассеты, содержащей сайт инициации транскрипции для Т 7 РНК-полимеразы, 5'-нетранслируемую лидерную последовательность из вирусного гена и стартовый кодон ATG. Лидерная последовательность, в свою очередь, несет сайт для связывания с рибосомами. Затем такая рекомбинантная молекула амплифицируется с помощью универсального и антисмыслового праймеров. Образующийся ПЦР-продукт in vitro транскрибируется в иРНК, а затем транслируется в белок.Англо-русский толковый словарь генетических терминов > PCR-expression
-
3 polymerase chain reaction
Метод амплификации in vitro с помощью ДНК-полимеразы нуклеотидных последовательностей с использованием олигонуклеотидных ДНК-затравок, комплементарных последовательностям противоположных цепей ДНК на границах амплифицируемого участка; собственно П.ц.р. представляет собой серию из 3 циклически повторяющихся реакций (20-30 циклов) - денатурация ДНК, отжиг ДНК-затравок и синтез ДНК с каждой из затравок навстречу друг другу с использованием противоположных цепей ДНК в качестве матриц, по завершении каждого цикла количество синтезированного продукта удваивается и происходит увеличение количества анализируемой ДНК в геометрической прогрессии; П.ц.р. позволяет амплифицировать любые последовательности длиной до 5-6 тыс. нуклеотидов, что делает возможным использовать ее для секвенирования, молекулярной ДНК-диагностики, картирования генов (в качестве зондов для гибридизации in situ) и др.* * *Полимеразная цепная реакция, ПЦР — процесс амплификации in vitro, при котором фрагмент ДНК длиной до 15 кб может быть амплифицирован (размножен) до 108 раз (копий). Для этого синтезируются два олигонуклеотида размером в 10-30 нуклеотидов, комплементарных последовательностям на двух концах исследуемой ДНК. Избыточное количество этих двух олигонуклеотидных праймеров (см.; амплимеров) смешивается с геномной ДНК, смесь нагревается для денатурации дуплексов ДНК. При последующем снижении температуры праймеры присоединяются к их геномным гомологам и могут с помощью ДНК-полимеразы удлиниться, т. е. на ДНК-матрице синтезируется вторая цепь. Последовательный процесс (цикл процессов) денатурации, отжига праймера и его удлинения повторяется 20-40 раз. В результате происходит экспоненциальное увеличение копий изучаемой ДНК. За 25 амплификационных циклов количество целевых последовательностей ДНК увеличивается приблизительно в 106 раз. Для синтеза новых цепей ДНК используются термостабильные ДНК-полимеразы (Therminus aquaticus или Taq-полимераза, Pfu-ДНК-полимераза, VentTM-ДНК-полимераза). В н. вр. ПЦР нашла широкое распространение в молекулярной биологии и на ее основе разработано множество методов анализа геномов. Имеет место также инвертированная полимеразная цепная реакция, т. е. модификация обычной ПЦР, позволяющая амплифицировать неизвестные последовательности ДНК, прилежащие к коровой области известной последовательности.
Англо-русский толковый словарь генетических терминов > polymerase chain reaction
-
4 PCR
* * *Полимеразная цепная реакция, ПЦР — процесс амплификации in vitro, при котором фрагмент ДНК длиной до 15 кб может быть амплифицирован (размножен) до 108 раз (копий). Для этого синтезируются два олигонуклеотида размером в 10-30 нуклеотидов, комплементарных последовательностям на двух концах исследуемой ДНК. Избыточное количество этих двух олигонуклеотидных праймеров (см.; амплимеров) смешивается с геномной ДНК, смесь нагревается для денатурации дуплексов ДНК. При последующем снижении температуры праймеры присоединяются к их геномным гомологам и могут с помощью ДНК-полимеразы удлиниться, т. е. на ДНК-матрице синтезируется вторая цепь. Последовательный процесс (цикл процессов) денатурации, отжига праймера и его удлинения повторяется 20-40 раз. В результате происходит экспоненциальное увеличение копий изучаемой ДНК. За 25 амплификационных циклов количество целевых последовательностей ДНК увеличивается приблизительно в 106 раз. Для синтеза новых цепей ДНК используются термостабильные ДНК-полимеразы (Therminus aquaticus или Taq-полимераза, Pfu-ДНК-полимераза, VentTM-ДНК-полимераза). В н. вр. ПЦР нашла широкое распространение в молекулярной биологии и на ее основе разработано множество методов анализа геномов. Имеет место также инвертированная полимеразная цепная реакция, т. е. модификация обычной ПЦР, позволяющая амплифицировать неизвестные последовательности ДНК, прилежащие к коровой области известной последовательности. -
5 targeted gene walking polymerase chain reaction
Шаговая полимеразная цепная реакция целевого гена — вариант обычной полимеразной цепной реакции (см.) для амплификации (см.) неизвестной последовательности ДНК, локализованной вверх или вниз (влево или вправо) от известной последовательности. Для этого первый последовательность-специфический ПЦР-праймер (целевой праймер, т.е. комплементарный экзону) и второй специфический праймер (внутренний праймер, гибридизующийся с той же нитью ДНК и расположенный близко к сайту целевого праймера) отжигаются (гибридизуются) к их целевым сайтам (мишеням) в геноме. Затем неспецифические, т.н. "шагающие" праймеры, комплементарные к последовательностям, расположенным выше или ниже мишени и сайта связывания внутреннего праймера, используются для амплификации расположенных между ними районов с помощью <I>Taq</I> ДНК-полимеразы (см. <I> полимераза Taq -полимераза </I>). Эту технику можно применять для изоляции последовательностей, прилежащих к уже известным районам без процедуры клонирования (см.) и выделения, а также для ДНК-фингерпринтинга (см.), обнаружения регуляторных районов и изолирования генов.
Англо-русский толковый словарь генетических терминов > targeted gene walking polymerase chain reaction
-
6 stutter band
Молекулярная генетика: статтерная полоса (дополнительная полоса при анализе фрагментов ДНК, обусловленная побочным продуктом при ПЦР-амплификации из-за "проскальзывания" полимеразы Taq)
См. также в других словарях:
ДНК-полимераза Taq — * ДНК полімераза Taq * Taq DNA polymerase термофильный фермент, осуществляющий репликацию ДНК, выделенный из термофильных бактерий Thermus aquaticus. ДНК п. Taq часто применяется в методе полимеразной цепной реакции и при секвенировании ДНК по… … Генетика. Энциклопедический словарь
Полимеразная цепная реакция — (ПЦР) экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Помимо амплификации ДНК, ПЦР… … Википедия
ПЦР — Запрос «ПЦР» перенаправляется сюда. Cм. также другие значения. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой… … Википедия
Полимеразная цепная — Запрос «ПЦР» перенаправляется сюда. Cм. также другие значения. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) экспериментальный метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой… … Википедия
Thermus aquaticus — ? Thermus aquaticus Thermus aquaticus, СЭМ Научная клас … Википедия
Полимер — (Polymer) Определение полимера, виды полимеризации, синтетические полимеры Информация об определении полимера, виды полимеризации, синтетические полимеры Содержание Содержание Определение Историческая справка Наука о Полимеризация Виды… … Энциклопедия инвестора
Экспрессия ПЦР — * экспрэсія ПЛР * expression PCR or e. polymerase chain reaction методика, объединяющая полимеразную цепную реакцию (см.) с транскрипцией (см.) и трансляцией (см.) in vitro определенного фрагмента ДНК (гена), с тем чтобы получить… … Генетика. Энциклопедический словарь
Фрагмент Кленова — (англ. Klenow fragment) это большой белковый фрагмент, образующийся при ферментативном расщеплении ДНК полимеразы I из E. coli протеазой субтилизином (subtilisin). Впервые фрагмент Кленова был описан в 1970 году, и имел 5’ → 3’… … Википедия
Полимеразная цепная реакция ПЦР — Полимеразная цепная реакция, ПЦР * полімеразная ланцуговая рэакцыя, ПЛР * polymerase chain reaction or PCR процесс амплификации (см.) in vitro, при котором фрагмент ДНК длиной до 15 кб может быть амплифицирован (размножен) до 108 раз (копий). Для … Генетика. Энциклопедический словарь
Шаговая полимеразная цепная реакция целевого гена — * крокавая полімеразная ланцуговая рэакцыя мэтавага гена * targeted gene walking polymerase chain reaction вариант обычной полимеразной цепной реакции (см.) для амплификации (см.) неизвестной последовательности ДНК, локализованной вверх или вниз… … Генетика. Энциклопедический словарь
